测定氨氮最常用的方法是纳氏比色法。水中氨与纳氏试剂 （K2HgI4） 在碱性条件下生成的化合物其颜色由黄逐渐加深到棕色，以此定量测定各种浓度的氨氮。
水样中钙、镁、铁等离子以及浊度、颜色的干扰，可用预蒸馏除去。水样中含有余氯时能与氨结合成氯胺，可用硫代硫酸钠脱氯。
3.9.1 仪器
3.9.1.1 500mL全玻璃蒸馏器。
3.9.1.2 分光光度计。
3.9.1.3 比色管，50mL。
3.9.2 试剂
全部试剂均需用无氨蒸馏水配制。无氨蒸馏水可用普通蒸馏水通过强酸性阳离子交换树脂或在1L蒸馏水中加0.1mL浓硫酸重蒸馏制得。
3.9.2.1 氨氮标准贮备溶液：将优级纯氯化铵于105℃烘烤1h，冷却后称取3.8190g溶于无氨蒸馏水中，并稀释至1000mL。此液1.00mL含1.00mg氨氮 （N）。
3.9.2.2 氨氮标准溶液：吸取10.00mL氨氮标准贮备溶液，用无氨蒸馏水稀释至1000mL。此液1.00mL含10.0μg氨氮 （N），临用时配制。
3.9.2.3 纳氏试剂：称取100g碘化汞 （HgI2） 和70g碘化钾 （KI） 溶于少量无氨蒸馏水中，将此混合液在搅动下徐徐倾入500mL32%的氢氧化钠冷溶液中，并用无氨蒸馏水稀释至1000mL。用具橡皮塞的棕色瓶贮存。注意，本试剂有毒!
3.9.2.4 0.35%硫代硫酸钠溶液：称取0.35g硫代硫酸钠 （Na2S2O3·5H2O）溶于无氨蒸馏水中，并稀释至100mL，此液为脱氯剂，取1mL此液可于500mL水样中除去1mg/L余氯。
3.9.2.5 磷酸盐缓冲溶液：称取7.15g无水磷酸二氢钾 （KH2PO4） 及34.4g磷酸氢二钾 （K2HPO4）或45.075gK2HPO4·3H2O溶于无氨蒸馏水中，并稀释至500mL。
3.9.2.6 2%硼酸溶液：称取20g硼酸溶于无氨蒸馏水中，并稀释至1000mL。
3.9.3 步骤
3.9.3.1 取200mL无氨蒸馏水和5mL磷酸盐缓冲液于全玻璃蒸馏器中，加入几粒玻璃珠，加热蒸馏，直至馏出液用纸氏试剂检不出氨为止。
3.9.3.2 稍冷后倾出并弃去蒸馏瓶中残液。然后量取100mL已脱氯水样或适量水样，加无氨蒸馏水稀释至200mL置于蒸馏瓶中，根据余氯量，计算加入硫代硫酸钠溶液脱氯。用稀氢氧化钠溶液调节水样呈中性。
3.9.3.3 加入 5mL 磷酸盐缓冲溶液，加热蒸馏。用 200mL 容量瓶为接收瓶，内装20mL硼酸溶液为吸收液。导管末端浸没在酸吸收液面下。待蒸出150mL左右时，放低馏出液，使导管末端离开液面，继续蒸馏以清洗冷凝管和导管，用无氨蒸馏水稀释至200mL，摇匀。
3.9.3.4 取50.0mL经蒸馏的水样 （如氨氮含量大于0.1mg，则取适量水样用无氨蒸馏水稀释至50mL）于50mL比色管中。
3.9.3.5 另取50mL比色管10支，分别加入氨氮标准溶液0，0.10，0.30，0.50，0.70，1.00，3.00，5.00，7.00，10.00mL，用无氨蒸馏水稀释至50.0mL。
3.9.3.6 向水样及标准溶液管内分别加入 1.0mL 纳氏试剂，混匀后放置10min，于420nm 波长，用1cm 比色皿，以无氨蒸馏水作参比，测定吸光度；如氨氮含量低于30μg，改用3cm 比色皿。低于10μg的氨氮可用目视比色。
3.9.4 计算，见式 （8）。
（8）
式中 M——从校准曲线上查得的样品管中氨氮含量，μg；
V——水样体积，mL。
